我們已經(jīng)了解了造成色譜柱內(nèi)徑數(shù)字不是整數(shù)的原因,剛才我們稍稍提過一下,小內(nèi)徑色譜柱的出現(xiàn)是出于溶劑節(jié)省和質(zhì)譜兼容性的原因,那么大家會問,既然小內(nèi)徑色譜柱有這些好處,為啥還沒有取代大內(nèi)徑的色譜柱?下面來大概解釋一下吧:
1、大內(nèi)徑色譜柱可以承載更大的上樣量
利用這個特性,我們可以進(jìn)行色譜制備純化,用很大內(nèi)徑的色譜柱,一次進(jìn)樣就可以純化很多樣品,還是用汽車做個例子,大公交比小面包可以裝更多的人。
2、大內(nèi)徑的色譜柱有更好的抗“溶劑效應(yīng)”能力
通常即使溶劑兼容性不是那么好的情況下,大內(nèi)徑色譜柱更容易得到更好的峰型。
3、大內(nèi)徑色譜柱對儀器的系統(tǒng)擴(kuò)散耐受能力較強(qiáng)
由于使用較高流速分析,大內(nèi)徑色譜柱由于儀器死體積造成的柱效損失會更小,而小內(nèi)徑色譜柱對死體積格外敏感,這也是是為什么現(xiàn)在的窄徑柱(內(nèi)徑小于等于2.1mm)都推薦使用在高性能的UHPLC儀器上的原因。
4、大內(nèi)徑對儀器的延遲體積影響相對不太敏感
主要也是由于使用高流速,可以盡量抵消延遲體積帶來的影響。
5、大內(nèi)徑可獲得更高流速
對于某些型號的儀器以及某些特殊的方法,高流速下容易獲得更好的混合精準(zhǔn)度,這主要是由于儀器的硬件性能限制導(dǎo)致的。
所以呢,色譜柱內(nèi)徑大小的選擇和使用,完全是要根據(jù)自己實際需要來選擇的,在某方面表現(xiàn)好,必然會有某方面的犧牲,尺有所短寸有所長,根據(jù)自己的儀器方法和實際需要選擇合適內(nèi)徑的色譜柱才是正道。
最后,至于UHPLC為什么會導(dǎo)致老范的對鉤變型,這是個挺復(fù)雜的問題,光靠老范畫的對鉤已經(jīng)無法解釋了,還得把他編的公式也拿出來,這個,作為后話吧...
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