離子色譜是實驗室常用設備之一，實驗人員對設備原理及維護進行全面掌握，使用及操作過程中注意儀器的維護和保養(yǎng)，才能熟練掌握離子色譜分析技術，滿足不同行業(yè)的應用需求?，F(xiàn)以離子色譜儀為例，介紹并分析設備使用操作的注意事項及技巧。

離子色譜 (Ion Chromatography)是高效液相色譜（HPLC）的一種，是分析陰離子和陽離子的一種液相色譜方法。離子色譜法的定義是：利用被測物質的離子性進行分離和檢測的液相色譜法。

離子色譜法在上世紀70年代逐步發(fā)展起來的一種微量離子分析技術，在分析測定陰、陽離子、離子型化合物方面具有靈敏、快速、準確度高、選擇多樣等優(yōu)點，獲得很多研究人員及技術人員的青睞，隨后離子色譜儀被廣泛應用于環(huán)境監(jiān)測、石油化工、農(nóng)藥、食品生產(chǎn)等行業(yè)。

由于樣品組成及其濃度復雜，樣品物理形態(tài)多變，對離子色譜儀的正常分析測定造成影響，為此，在使用儀器前，應安排專門人員進行必要的培訓，對設備原理及維護進行全面掌握，使用及操作過程中注意儀器的維護和保養(yǎng)，才能熟練掌握離子色譜分析技術，滿足不同行業(yè)的應用需求?，F(xiàn)以離子色譜儀為例，介紹并分析設備使用操作的注意事項及技巧。

離子色譜儀原理

離子色譜法是以低交換容量的離子交換樹脂為固定相對離子性物質進行分離, 用電導檢測器連續(xù)檢測流出物電導變化。

離子色譜類型

離子色譜可以分為三種類型：離子交換色譜、離子排斥色譜、離子對色譜。

1、離子交換色譜

高效離子交換色譜，應用離子交換的原理，采用低交換容量的離子交換樹脂來分離離子，這在離子色譜中應用最廣泛，其主要填料類型為有機離子交換樹脂，以苯乙烯二乙烯苯共聚體為骨架，在苯環(huán)上引入磺酸基，形成強酸型陽離子交換樹脂，引入叔胺基而成季胺型強堿性陰離子交換樹脂，此交換樹脂具有大孔或薄殼型或多孔表面層型的物理結構，以便于快速達到交換平衡，離子交換樹脂耐酸堿可在任何pH范圍內使用，易再生處理、使用壽命長，缺點是機械強度差、易溶易脹、受有機物污染。

硅質鍵合離子交換劑以硅膠為載體，將有離子交換基的有機硅烷與基表面的硅醇基反應，形成化學鍵合型離子交換劑，其特點是柱效高、交換平衡快、機械強度高，缺點是不耐酸堿、只宜在pH2-8范圍內使用。

2、離子排斥色譜

它主要根據(jù)Donnon膜排斥效應，電離組分受排斥不被保留，而弱酸則有一定保留的原理，制成離子排斥色譜主要用于分離有機酸以及無機含氧酸根，如硼酸根碳酸根和硫酸根有機酸等。它主要采用高交換容量的磺化H型陽離子交換樹脂為填料以稀鹽酸為淋洗液。

3、離子對色譜

離子對色譜的固定相為疏水型的中性填料，可用苯乙烯二乙烯苯樹脂或十八烷基硅膠(ODS)，也有用C8硅膠或CN，固定相流動相由含有所謂對離子試劑和含適量有機溶劑的水溶液組成，對離子是指其電荷與待測離子相反，并能與之生成疏水性離子，對化合物的表面活性劑離子，用于陰離子分離的對離子是烷基胺類如氫氧化四丁基銨氫氧化十六烷基三甲烷等，用于陽離子分離的對離子是烷基磺酸類，如己烷磺酸鈉，庚烷磺酸鈉等對離子的非極性端親脂極性端親水，其CH2鍵越長則離子對化合物在固定相的保留越強，在極性流動相中，往往加入一些有機溶劑，以加快淋洗速度，此法主要用于疏水性陰離子以及金屬絡合物的分離，至于其分離機理則有3種不同的假說，反相離子對分配離子交換以及離子相互作用。

色譜儀使用注意事項

1、流動相瓶中濾頭要注意始終處于液面以下，防止將溶液吸干。

2、啟動泵前觀察從流動相瓶到泵之間的管路中是否有氣泡，如果有則應將其排除。

排除方法如下：先將與泵相連的塑料流路接頭擰下來，用洗耳球吸滿去離子水，從與泵段相連的流路管中注入，將流路管中的氣泡排除干凈。然后再將流動相瓶（一般為去離子水瓶）抬高，再將流路接頭與泵連接好。啟動泵，打開泵內排氣閥選鈕，將泵內氣泡排除干凈，一般觀察為流出液比較均勻，再將泵排氣閥擰緊。（注意：此項操作時，整個流路是與色譜柱斷開的）

3、用去離子水或流動相清洗整個流路時，可以采用大流量清洗（一般可將流量設置為2.0ml/min，但不能再太大）以縮短清洗時間，但在通流動相接色譜柱時需要將流量調整為色譜柱使用流量條件。

操作如下：先將泵停止，再按動正號或負號，將光標調整至流量位置，按下確認鍵，再通過調節(jié)正負號將流量調節(jié)至色譜柱使用條件后，再按確認鍵。此時需要等待5s后再啟動泵開關。

接色譜柱時注意先將接頭在色譜柱前端抵上2-5s，將色譜柱前端氣泡排除后再將接頭擰緊。待色譜柱下端流出溶液后，在將色譜柱下端接頭擰上。（注意：接頭不能擰的太緊，防止將管路卡的太緊而造成系統(tǒng)壓力增大，擰的程度以不漏液為宜）

4、 使用陰離子色譜柱檢測，通流動相時注意將電流旋鈕打開，調節(jié)至70±5mA，實驗完畢，在關閉高壓泵以前將電流關閉。

5、 進樣時閥的扳動要注意，不能太快，以免損傷閥體； 也不能太慢，以免造成樣品流失。在進樣過程中，要嚴格按清洗程序操作，以減小前次樣品殘留對本次檢測的影響。

離子色譜儀的維護

1、對泵的維護

（1）每次儀器使用前，通水20min，用于清洗泵和整個流路。

（2）每次實驗完畢，通水20min，將泵中殘留的流動相清洗干凈。（注意：此步非常重要，直接關系到泵的正常使用）

（3）儀器長時間不用，一周得通去離子水一次。用于替換泵中已經(jīng)滋生了少量微生物的去離子水。去離子水如果長期放置，會促使少量微生物的繁殖，微生物容易粘附在泵內的單向閥上。

2、對色譜柱的維護

（1）進入色譜柱的樣品，均需要對其進行前處理。樣品中固體懸浮物、有機物和重金屬是影響色譜柱柱效的三大因素。

固體懸浮物的消除：使用0.45或0.22微米孔徑的微孔濾膜將樣品過濾即可。

有機物： 固態(tài)樣品，其各檢測組份對高溫仍比較穩(wěn)定的，可以采用高溫灰化-淋洗液或去離子水浸取法將有機，直接IC檢測。

液態(tài)樣品，可以采用22%雙氧水微波消解1.5h除去有機物后調節(jié)PH至中性，直接IC進樣檢測。（注意溶液濃度之間的換算）

重金屬：可以將樣品流經(jīng)陽離子交換樹脂除去重金屬后直接IC進樣。

（2）組份高含量樣品影響色譜柱柱效。

高Cl-樣品的處理：將樣品通過Ag處理柱將Cl-除去后進樣或稀釋后進樣分析。

高SO42-樣品的處理：將樣品通過Ba處理柱將SO42-除去后進樣或稀釋后進樣分析。

（3）實驗操作完畢，色譜柱用淋洗液密封保存。

3、對抑制器的維護

通陰離子淋洗液時將電流旋鈕打開，陰離子檢測完成關閉泵以前將電流旋鈕關閉。