高壓蒸汽滅菌鍋的正確使用解惑

高壓蒸汽滅菌，用高溫加高壓滅菌，不僅可殺死一般的細(xì)菌、真菌等微生物，對芽孢、孢子也有殺滅效果，是最可靠、應(yīng)用最普遍的物理滅菌法。在選修1教材技術(shù)實(shí)踐中多次使用。

問題：高壓蒸汽滅菌如何操作？需要注意哪些事項(xiàng)呢？

01 高壓蒸汽滅菌結(jié)構(gòu)和原理

高壓蒸汽滅菌器是利用飽和壓力蒸汽對物品進(jìn)行迅速而可靠地消毒滅菌的設(shè)備，適用于醫(yī)療衛(wèi)生、科研、農(nóng)業(yè)等單位?？蓪︶t(yī)療器械、敷料、玻璃器皿、溶液培養(yǎng)基等進(jìn)行消毒滅菌。

高壓蒸汽滅菌器按照樣式和大小分為手提式高壓蒸汽滅菌器、立式高壓蒸汽滅菌器、臥式高壓蒸汽滅菌器等。手提式高壓蒸汽滅菌器的容積通常為18L、24L、30L。立式高壓蒸汽滅菌器的容積范圍通常為30L-200L，進(jìn)一步又可分為手輪型、翻蓋型、智能型。智能型又分為 標(biāo)準(zhǔn)配置型、蒸汽內(nèi)排型、真空干燥型。臥式高壓蒸汽滅菌器通常為大型臥式高壓滅菌鍋。

高壓蒸汽滅菌器由滅菌室、控制系統(tǒng)、過壓保護(hù)裝置等組成。

滅菌的原理是利用高溫飽和水蒸汽在一定時(shí)間內(nèi)可使微生物的蛋白質(zhì)變性導(dǎo)致微生物死亡的功效，達(dá)到對耐濕耐熱物品進(jìn)行滅菌的目的。

溫度上升的原理是由于在密閉的蒸鍋內(nèi)蒸汽不能外溢，隨著壓力不斷上升水的沸點(diǎn)也會(huì)不斷提高，從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加，在0.1MPa壓力下鍋內(nèi)溫度可達(dá)121℃。在此蒸汽溫度下可以很快殺死各種細(xì)菌。

02滅菌操作程序

1.滅菌物品的包裝和容器要合適
首先將內(nèi)層滅菌桶取出，再向外層鍋內(nèi)加入適量的水，使水面與三角擱架相平為宜。放回滅菌桶，并裝入待滅菌物品。需要滅菌的物品按需要分類包裝，物品包裝用線繩捆扎，以不松動(dòng)散開為宜，不宜過緊，培養(yǎng)皿等器皿需要用牛皮紙包扎。
2.滅菌物品裝放應(yīng)合理
滅菌鍋內(nèi)物品不能過擠，不能超過鍋內(nèi)容量。盡量將同類物品裝在同一鍋內(nèi)滅菌。若有不同類物品裝放在一起，應(yīng)以難達(dá)到滅菌物品的所需溫度和時(shí)間為準(zhǔn)。物品裝放時(shí)，上下左右均應(yīng)交叉錯(cuò)開，留出縫隙，使蒸汽容易穿透。大滅菌包應(yīng)立著放上層，小包放下層，布類和金屬類物品同時(shí)滅菌時(shí)，應(yīng)將金屬類物品包放在下層，使兩者受熱基本一致，并防止金屬物品滅菌中產(chǎn)生的冷凝水弄濕包布。
加蓋，并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)。再以兩兩對稱的方式同時(shí)旋緊相對的兩個(gè)螺栓，使螺栓松緊一致，勿使漏氣。
3.排盡冷空氣
打開電源加熱，并同時(shí)打開排氣閥，使水沸騰以排除鍋內(nèi)的冷空氣。使用高壓蒸汽滅菌器時(shí)，最關(guān)鍵的是將鍋內(nèi)空氣排盡。如鍋內(nèi)有空氣，則氣壓針?biāo)傅膲簭?qiáng)不是飽和蒸汽產(chǎn)生的壓強(qiáng)。相同的壓強(qiáng)，混有空氣的蒸汽其溫度低于飽和蒸汽所產(chǎn)生的溫度。因此完全排除鍋內(nèi)空氣使鍋內(nèi)全部是水蒸氣，滅菌才能徹底。
常用方法是：關(guān)閉放氣閥，通電后，待壓力上升到0.05MPa時(shí)，打開放氣閥，放出空氣，待壓力表指針歸零后，再關(guān)閉放氣閥。關(guān)閥再通電后，壓力表上升達(dá)到0.1MPa時(shí)，開始計(jì)時(shí)，維持壓力到指定的時(shí)間。
4.合理計(jì)算滅菌時(shí)間
待冷空氣完全排盡后，關(guān)上排氣閥，讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升。當(dāng)鍋內(nèi)壓力升到所需壓力時(shí)，控制熱源，維持壓力至所需時(shí)間。
滅菌時(shí)間包括：穿透時(shí)間，從鍋內(nèi)達(dá)到滅菌溫度開始到鍋內(nèi)最難達(dá)到的部位也達(dá)到此溫度所需要的時(shí)間；維持時(shí)間，即殺滅微生物所需要的時(shí)間，一般以殺滅嗜熱脂肪桿菌芽胞所需時(shí)間來表示；安全時(shí)間，為使滅菌得到確切保證所需要增加的時(shí)間，一般為熱死亡時(shí)間的一半，其長短視滅菌物品而定。
對易導(dǎo)熱的金屬器材的滅菌，不需要安全時(shí)間。在滅菌時(shí)間內(nèi)，要注意觀察壓力表，以保持規(guī)定的壓力，維持到滅菌時(shí)間為止。在滅菌過程中，如有壓力、溫度下降，應(yīng)重新升溫升壓，重新計(jì)時(shí)。
5.開蓋操作
達(dá)到滅菌時(shí)間后即可切斷電源，一般當(dāng)壓力表的壓力降至0之后，再打開排氣閥。有時(shí)，在壓力降到0.05MPa，可緩慢放出蒸汽，注意不要使壓力降低太快，以致引起激烈的減壓沸騰，使容器中的液體四溢。當(dāng)壓力降到零后才能開蓋，旋松螺栓，打開蓋子，取出滅菌物品。取出培養(yǎng)基擺在平臺(tái)上以待冷凝，不可以長久不取出，否則容易引起培養(yǎng)基成分變化以至無法制作斜面培養(yǎng)基。
如果因?yàn)榫貌环艢鈱?dǎo)致鍋爐內(nèi)產(chǎn)生負(fù)壓、蓋子打不開，可以將放氣閥打開，讓空氣進(jìn)入，內(nèi)外壓力平衡后蓋子就可以打開了。取無菌物品時(shí)，要嚴(yán)格無菌操作。同時(shí)應(yīng)分類放置，順序發(fā)放取用。
6.高壓滅菌時(shí)間控制
如無菌水、栽培介質(zhì)、接種用具，可以延長滅菌時(shí)間或提高壓力。而培養(yǎng)基要嚴(yán)格遵守保壓時(shí)間，既要保壓徹底，又要防止培養(yǎng)基中的成分變質(zhì)或效力降低，不能隨意延長時(shí)間。
另外，含有鹽分的液體漏出或溢出時(shí)，一定要及時(shí)擦干凈，沿著蓋子的密封圈要徹底擦干，否則會(huì)腐蝕容器和管道。 不要在爆炸性氣體附近使用儀器。

03若干問題解疑

1.哪些物品可以高壓蒸汽滅菌？

不是所有的物品都可以高壓蒸汽滅菌的，例如，有破壞性材料和含堿金屬成份的物質(zhì)，否則會(huì)導(dǎo)致爆炸、腐蝕內(nèi)膽和內(nèi)部管道或破壞墊圈。

2.選擇121度有什么好處或者原理嗎？

其實(shí)，不同的產(chǎn)品對溫度的承受和要求是不一樣的，大多數(shù)食品都是選擇121°來經(jīng)過15min以上來達(dá)到滅菌，以便于長期保存的目的。這個(gè)溫度下能使所有的微生物殺死，包括芽孢休眠體。

但是一些食品也可能選擇其他溫度來殺菌，比如牛奶就是巴氏殺菌，溫度只有60多度。因?yàn)闇囟葧?huì)影響產(chǎn)品營養(yǎng)和風(fēng)味，這個(gè)溫度是對產(chǎn)品影響最小且達(dá)到的效果最好的一個(gè)選擇。

當(dāng)然不只是和溫度有關(guān)，還有壓力及時(shí)間等要求，必須這3個(gè)保證才能達(dá)到滅菌的最佳效果。

3.為什么滅菌偏偏選擇121度？而不是120度或者122度呢？

這個(gè)溫度是在1Kg/cm²壓力下，通過物理公式克拉伯龍方程（PV=nRT）計(jì)算得到的。

4.標(biāo)準(zhǔn)大氣壓也要101.3KPa,怎么會(huì)設(shè)定在100KPa ,比標(biāo)準(zhǔn)大氣壓還要小的壓力？

設(shè)定的1Kg/cm²壓力，相當(dāng)于100KPa，表面上看起來比標(biāo)準(zhǔn)大氣壓也小，按照物理學(xué)原理，其實(shí)是比大氣壓大100KPa，也就是說，這是壓力差。計(jì)算的結(jié)果正好是121度。

還有更多關(guān)于高壓蒸汽滅菌器的問題，歡迎聯(lián)系集思。

武漢集思儀器設(shè)備有限公司致力于打造世界先進(jìn)水平又適合國內(nèi)的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備，致力于為您度身定制系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室整體解決方案，是華中地區(qū)規(guī)模型實(shí)驗(yàn)室服務(wù)一站式供應(yīng)商，已為超過5000個(gè)國內(nèi)知名企事業(yè)單位提供專業(yè)實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備，咨詢熱線：027-85518521，400-0027-510，17720504339。