高效液相色譜儀主要由儲液器、高壓泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀六部分組成。

1、儲液器

儲液器是用于存放溶劑的裝置。貯液器中的溶劑必須很純，貯液器材料要耐腐蝕，對溶劑呈惰性，一般情況下通常采用1升~2升的大容量玻璃瓶，也可采用不銹鋼制成的容器，貯液器應(yīng)配有溶劑過濾器，以防止流動相中的顆粒進(jìn)入泵內(nèi)，溶劑過濾器一般用耐腐蝕的鎳合金制成，孔隙大小一般為2μm。

2、高壓泵

高壓泵應(yīng)耐壓、耐腐蝕、密封性好。其主要用于輸送流動相，其壓力一般為幾兆帕至數(shù)十兆帕，這時(shí)液體的黏度比氣體大100倍。同時(shí)由于固定相的顆粒極細(xì)，柱內(nèi)壓降大，為保證一定的流速，必須借助高壓迫使流動相通過柱子。高壓泵應(yīng)無脈動或脈動極小，以保證輸出的流動相具有恒定的流速，同時(shí)采用脈動阻尼裝置可將產(chǎn)生的脈動除去，使流動相的流量變動范圍不宜超過2%~3%。高壓泵主要分為恒壓泵、恒流泵和螺旋傳動注射泵三類。

（1）恒壓泵

恒壓泵輸出的壓力恒定，當(dāng)具有一定壓力的氣體作用在一個(gè)大面積活塞上,大面積活塞再驅(qū)動一個(gè)小面積活塞，小面積活塞承受的壓力是大面積活塞的幾十倍，從而得到壓力恒定的流出液。

（2）恒流泵

恒流泵的主要功能是輸出的流量恒定，如往復(fù)柱塞泵、螺旋傳動注射泵等。往復(fù)柱塞泵與恒壓泵不同，通常采用電驅(qū)動活塞，當(dāng)活塞迅速向上動時(shí)，由于減壓使入口止逆閥開啟，出口止逆閥關(guān)閉，貯液器中的流動相被吸入柱內(nèi)，形成一個(gè)循環(huán)，然后再開始下一個(gè)循環(huán)。使用這種泵時(shí)一定要連接脈動阻尼器，將產(chǎn)生的脈動除去，若采用雙活塞泵，使雙活塞在相移180°下工作，可使脈動互相抵消，減小噪聲。往復(fù)柱塞泵的流量與外界阻力無關(guān)，恒流泵具有體積小的特點(diǎn)，非常適合于梯度洗脫。

（3）螺旋傳動注射泵

螺旋傳動注射泵是用電力以很慢的恒定速率驅(qū)動活塞，使流動相連續(xù)輸出，當(dāng)活塞到達(dá)末端時(shí)，輸出中止，然后由另一個(gè)吸入沖程使溶劑重新充滿再開始第二次輸出，輸出時(shí)間的長短決定于泵腔體積及輸出流量。

3、進(jìn)樣器

液相色譜儀進(jìn)樣器普遍使用高壓進(jìn)樣閥，用微量注射器將樣品注入樣品環(huán)管，使用的樣品環(huán)管分別有不同的尺寸，可根據(jù)分析要求選用。當(dāng)進(jìn)樣閥手柄放在吸液位置時(shí)，流動相直接通過孔的通路流向色譜柱，樣品通過注射器從另外的位置進(jìn)入樣品環(huán)管，如果有過量的樣品則會從出口孔排出，然后將手柄轉(zhuǎn)到進(jìn)樣位置，此時(shí)流動相便將樣品帶進(jìn)色譜柱。

4、色譜柱

色譜柱是整個(gè)色譜系統(tǒng)的心臟，它的質(zhì)量優(yōu)劣直接影響到分離的效果。一般情況下色譜柱通常采用不銹鋼管制成，并且柱內(nèi)壁必須光潔平滑，否則內(nèi)壁的縱向溝痕和表面多孔性也會引起譜帶的展寬。柱接頭的體積應(yīng)盡可能小，柱長一般為10cm~25cm，內(nèi)徑4mm ~5mm。若使用直徑為5μm~10μm固定相顆粒，理論塔板可達(dá)到5×104/m。尺寸排阻色譜柱的內(nèi)徑通常大于5mm，制備色譜柱則會更大；為了減少溶劑用量，可采用微徑柱，內(nèi)徑為1mm，長度為30mm~75mm，若采用3μm顆粒，理論塔板數(shù)高達(dá)1×105/m。

為了保護(hù)分析柱不被污染，有時(shí)需在分析柱前加一短柱，約數(shù)厘米長，此柱稱為保護(hù)柱。為了防止保護(hù)柱過分增加柱阻力，在保護(hù)柱中使用的顆粒大小約為10μm~30μm。

5、檢測器

液相色譜儀常用的檢測器有紫外吸收檢測器、光電二極管陣列檢測器、示差折光檢測器、熒光檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器等。

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