在色譜分析中,如何選擇最佳的色譜條件以實現(xiàn)最理想的分離,是色譜工作者的重要工作。色譜是一種分離分析的手段,分離是核心,因此可以說擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。因此選擇一個合適的色譜柱非常重要。
對色譜柱的基礎(chǔ)要求是:柱效高、選擇性好,分析速度快等。目前市售的用于HPLC的各種色譜柱種類繁多,從色譜柱填料來分,可分為硅膠基質(zhì)和有機雜化球基質(zhì)的色譜柱,還有不同長短、不同微粒大小的色譜柱。
色譜柱的選擇可根據(jù)待分析樣品的極性、分子量大小、是否可溶于水等因素來考慮。如樣品分子量大于2000的,可溶于水的,可選擇凝膠色譜柱、大孔徑反相色譜柱、大孔徑離子交換色譜柱。分子量小于2000的,溶于有機相的,可選擇正相模式色譜柱。溶于水,可電離的樣品可選擇反相模式色譜柱或離子交換或未經(jīng)涂漬親水模式的色譜柱等。
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