我們在以前的文章中給大家講過在流動(dòng)相使用過程中應(yīng)該做的事情，除了有所為，還要有所不為，那有哪些習(xí)慣是需要避免的呢？

1、加入有機(jī)相之后再測量流動(dòng)相的PH值

通常情況下測量流動(dòng)相的PH值，是測量水相中的PH值參數(shù)。有機(jī)相加入之后PH值參數(shù)的測量就和之前有誤差。

PS：但如果能保證每次測量都是加入相同量的有機(jī)相之后得到的PH值，雖然這不能保證精確度，但是這能保證前后一致的測量結(jié)果，所以這樣也沒有問題。

2、不使用緩沖鹽

緩沖鹽的加入是用來控制和修正流動(dòng)相中PH值的改變的。

樣品基質(zhì)、空氣中的CO2、水中的雜質(zhì)都會(huì)造成流動(dòng)相PH值的改變，而PH值的改變會(huì)影響樣品的保留、峰形、峰面積參數(shù)。

3、沒有在正確的緩沖區(qū)間使用緩沖鹽

每個(gè)緩沖鹽都有一定的緩沖范圍，在此范圍內(nèi)它提供了最佳的pH穩(wěn)定性。在這個(gè)范圍外，緩沖鹽在抵抗pH值變化方面是無效的。

所以要么在正確的范圍內(nèi)使用緩沖鹽，要么選擇一個(gè)緩沖范圍覆蓋所需pH值的緩沖鹽。

4、向有機(jī)相中加入緩沖鹽

如果將水相的緩沖溶液加入到有機(jī)相中，會(huì)大大增加緩沖鹽析出的風(fēng)險(xiǎn)。

緩沖鹽的析出在初期可能并不明顯，但會(huì)對儀器的各個(gè)部件都會(huì)產(chǎn)生一定影響。

5、梯度洗脫時(shí)直接用泵去混合流動(dòng)相并且流動(dòng)相比例從0%開始

現(xiàn)在的液相色譜能夠非常高效的進(jìn)行在線脫氣和流動(dòng)相混合。但是將梯度洗脫比例從0%開始，會(huì)有比較大的出現(xiàn)氣泡和沉淀的風(fēng)險(xiǎn)。

6、沒有使用正確的pH值修飾酸或堿作為緩沖液

緩沖溶液的修飾酸或堿，只使用生成緩沖鹽的酸或堿。例如，磷酸鈉緩沖液只能用磷酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)。

7、沒有在方法中說明緩沖液的全部信息

例如只在方法中寫“稱5克磷酸鈉溶入1000毫升水”。

緩沖鹽的類型決定其pH緩沖范圍，而緩沖鹽中所需物質(zhì)的濃度決定了緩沖強(qiáng)度。例如：5g的無水磷酸鈉和5g的一水磷酸鈉具有不同的緩沖強(qiáng)度，會(huì)影響保留率。

8、使用儀器時(shí)不調(diào)查之前使用的流動(dòng)相情況，直接用純有機(jī)溶劑沖系統(tǒng)

如果之前的方法在B通道使用緩沖溶液，而這次沒有經(jīng)過調(diào)查就直接在B通道使用了純的有機(jī)溶劑，那么就會(huì)造成該通道緩沖鹽析出、出現(xiàn)堵塞等風(fēng)險(xiǎn)。

9、將溶劑瓶中的流動(dòng)相用干為止

溶劑瓶中的流動(dòng)相如果用干，會(huì)導(dǎo)致儀器中出現(xiàn)氣泡等問題。

10、僅使用超聲來給流動(dòng)相脫氣

超聲脫氣有一定的脫氣作用，但完全脫氣的效果并不理想。

所以在此建議使用真空脫氣機(jī)進(jìn)行在線脫氣。

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